1.Elasticsearch 8.10 同义词管理新篇章：引入同义词 API
Elasticsearch 的同义词功能是一个重要的文本分析工具，特别是在全文搜索应用中。同义词机制使得用户能够建立一个同义词库，以处理一词多义、多词同义等情况，从而增强搜索的准确性和丰富性。
1、同义词在搜索引擎领域用途
同义词在搜索引擎领域的用途可概括如下：
- 增强搜索的准确性——当用户输入一个关键词时，可能与他们实际意图相关的文档使用了一个不同的关键词或短语。同义词允许搜索引擎理解和识别这些情况，返回更准确的结果。如：“遥遥领先”和“华为Meta60”同义词。
- 提高用户体验——用户可能不知道或者忘记了某个特定的术语，但通过使用同义词，他们仍然可以找到他们正在寻找的内容。
- 多语言或方言支持——对于支持多种语言或方言的应用，同义词可以帮助桥接词汇差异，如：data 和 数据同义。
- 行业特定术语——特定行业或领域可能有其专有的术语，同义词可以帮助搜索引擎理解这些术语和更通用的关键词之间的关系。比如：“锤子”在计算机领域和其他领域含义不同。
2、Elasticsearch 领域同义词应用场景
电商平台
顾客可能会使用不同的关键词搜索相同的产品。
例如，他们可能搜索“冰箱”或“冷藏库”。通过使用同义词，电商平台可以确保无论客户使用哪种术语，都能找到相关的产品。
例如：“画匠、画工、画师”三个是同义词，“番茄，西红柿”是同义词……
新闻或内容聚合网站
人们可能使用不同的关键词来描述或搜索同一事件或主题。例如，“COVID-19”、“冠状病毒”和“新型冠状病毒”都可能指向与疫情相关的文章。
某特定新闻场景下，中文和英文要做同义词处理，举例：科学 和 science 是同义词，数据 和 data 是同义词…..
医疗或科学研究
不同的研究者可能使用不同的术语描述相同的概念或技术。
通过使用同义词，研究数据库可以确保研究者找到所有相关的文献，而不仅仅是使用特定术语的文献。
企业搜索
员工可能不熟悉所有公司内部使用的术语或缩写。比如：WOC和广域网加速是相同的含义。
同义词可以帮助员工更容易地找到他们正在寻找的内部文档或资源。
3、早期版本 Elasticsearch 同义词使用概览
我拿 Elastic 认证考试的同义词的一个知识点解读一下。
3.1 Elasticsearch 同义词用途
自定义分词，有同义词的业务场景。用户期望搜索相同的同义词组（二个或者多个），评分结果一致。
3.2 应用举例
同义词过滤 核心demo
PUT test_004/_bulk
{"index":{"_id":1}}
{"title":"oa is very good"}
{"index":{"_id":2}}
{"title":"oA is very good"}
{"index":{"_id":3}}
{"title":"OA is very good"}
{"index":{"_id":4}}
{"title":"dingding is very good"}
{"index":{"_id":5}}
{"title":"dingding is ali software"}
{"index":{"_id":6}}
{"title":"0A is very good"}
# return 2
POST test_004/_search
{
"query": {
"match": {
"title": "dingding"
}
}
}
POST test_004/_search
{
"query": {
"match": {
"title": "OA"
}
}
}
DELETE task2
# 同义词的设置最核心
PUT /task2
{
"settings": {
"index": {
"analysis": {
"analyzer": {
"synonym": {
"tokenizer": "whitespace",
"filter": [
"synonym"
]
}
},
"filter": {
"synonym": {
"type": "synonym",
"lenient": true,
"synonyms": [
"oa, oA, Oa, OA, 0A, dingding"
]
}
}
}
}
},
"mappings": {
"properties": {
"title":{
"type": "text",
"analyzer": "synonym"
}
}
}
}
POST _reindex
{
"source": {
"index": "test_004"
},
"dest": {
"index": "task1"
}
}
GET task2/_mapping
POST task2/_analyze
{
"analyzer": "synonym",
"text":"dingding is good software"
}
3.3 具体同义词含义解读
最核心部分：
- 举例1："synonyms" : ["foo, bar => baz"]
含义是：foo 和 bar的同义词都是 baz。
等价于：foo 与 baz一致，bar与 baz一致。
- 举例2："synonyms": [ "oa, oA, Oa, OA, 0A, dingding" ] 含义：oa, oA, Oa, OA, 0A, dingding 互为同义词。
检索：dingding等价于：检索——oa，oA，Oa，OA，0A， dingding。
上述方式的弊端非常明显：同义词不支持更新，如果需要更新需要 reindex 才可以！
那么有没有支持更新的方案呢？Elasticsearch 8.10 版本迎来新的更新。
4、Elasticsearch 同义词最新方案——同义词API
我们讨论了同义词以及它们在提供优质搜索体验中的重要性。
使用同义词能：
- 找到使用与搜索查询相似词语的文档；
- 使特定领域的词汇更加用户友好，让用户用他们熟悉的词找到结果；
- 纠正常见的拼写错误或打字错误。
随着时间的推移，搜索结果需要不断演变。
新商品上架，新趋势改变了用户的搜索习惯，新词汇成为搜索领域的一部分。
为了应对这些变化，Elasticsearch引入了新的同义词API，以帮助无缝管理和更新同义词。
5、为何 Elasticsearch 需要同义词API？
在以前的做法中，更新同义词有些步骤需要手动操作：
- 我们需要将同义词文件上传到 Elasticsearch 集群的每个节点。
- 必须确保同义词过滤器（Token Filters）配置了正确的路径。
- 同义词文件需要在每个节点上进行更新，并保持同步。
这样做是可行的，但它涉及到像文件上传、维护更新等基础设施工作，并需要了解每个同义词文件的用途。
现在，8.10 版本之后，我们进入同义词API时代。
与之前基于文件的同义词更新方法相比，使用同义词API有多个优点：
- 提供了一个基于API的机制用于定义同义词。
- 对分析过程提供了自动重新加载机制，后面会用到 updateable 参数就是解决这个问题。
- 允许进行细粒度的同义词管理。
6、Elasticsearch 同义词 API 实操指南
6.1 创建同义词集
你可以用以下API请求创建一个新的同义词集：
PUT _synonyms/my-synonyms-set
{
"synonyms_set": [
{
"id": "pc",
"synonyms": "pc => personal computer"
},
{
"id": "computer",
"synonyms": "computer,laptop"
}
]
}
6.2 配置同义词集
一旦创建，你的同义词集可以用作同义词、同义词集合（set）过滤器的一部分。配置如下：
PUT /synonym_set_test
{
"settings": {
"index": {
"analysis": {
"analyzer": {
"synonym_analyzer": {
"tokenizer": "whitespace",
"filter": ["my_synonyms"]
}
},
"filter": {
"my_synonyms": {
"type": "synonym",
"synonyms_set": "my-synonyms-set",
"updateable": true
}
}
}
}
}
}
6.3 更新同义词集
6.3.1 批量更新
你可以通过更新所有的同义词规则来更新一个同义词集。
PUT _synonyms/my-synonyms-set
{
"synonyms_set": [
{
"id": "pc",
"synonyms": "pc => personal computer"
},
{
"id": "computer",
"synonyms": "computer, pc, laptop, desktop"
}
]
}
6.3.2 单个更新
或者，你也可以管理单个同义词规则：
PUT _synonyms/my-synonyms-set/computer
{
"synonyms": "computer, pc, laptop, desktop"
}
6.4 验证一把同义词效果
## 设置同义词集合
PUT _synonyms/my-synonyms-set-v1
{
"synonyms_set": [
{
"id": "huawei",
"synonyms": "huawei, yylx, yyds"
}
]
}
## 创建索引，自定义分词指定同义词集
PUT synonym_set_test_v1
{
"settings": {
"index": {
"analysis": {
"analyzer": {
"synonym_analyzer": {
"tokenizer": "whitespace",
"filter": [
"my_synonyms"
]
}
},
"filter": {
"my_synonyms": {
"type": "synonym",
"synonyms_set": "my-synonyms-set-v1",
"updateable": true
}
}
}
}
},
"mappings": {
"properties": {
"title": {
"type": "text",
"search_analyzer": "synonym_analyzer"
}
}
}
}
## 批量写入数据
POST synonym_set_test_v1/_bulk
{"index":{"_id":1}}
{"title":"yylx is very well"}
{"index":{"_id":2}}
{"title":"yyds is very good"}
{"index":{"_id":3}}
{"title":"huawei is very nb"}
注意：易出错点！
执行如下检索后，
## 执行检索
POST synonym_set_test_v1/_search
{
"query": {
"match": {
"title": "yyds"
}
}
}
召回结果如下：
再执行一下同义词更新：
## 更新词典
PUT _synonyms/my-synonyms-set-v1
{
"synonyms_set": [
{
"id": "huawei",
"synonyms": "huawei, yylx, yyds, meta60, 遥遥领先"
}
]
}
再执行一下如下检索：
## 依然可以召回！！
POST synonym_set_test_v1/_search
{
"query": {
"match": {
"title": "遥遥领先"
}
}
}
召回结果如下：
6.5 同义词API 使用小结及注意事项
当你在Elasticsearch中使用同义词时，关键的决策在于：是在索引时使用它们，还是在搜索时使用它们？
- 场景1：索引时使用
这意味着当你把文档输入到 Elasticsearch 时，同义词就已经被应用了。
这种方式的缺点是，如果你想更改同义词，就必须重新对所有数据进行索引，这既耗时又可能导致数据中断。
- 场景2：搜索时使用
这意味着只有当执行搜索时，同义词才会被应用。
这种方式更加灵活，因为你可以随时更改同义词，而无需重新索引。
特别是，如果你的令牌过滤器配置了"updateable": true，当你更改同义词时，可以重新加载搜索分析器。
还有一个小贴士：如果你使用Elasticsearch的同义词 API 创建的同义词集，那么它们只能在搜索时使用（对应上面介绍的报错截图理解一下这里）。
所以，你可以选择将包含同义词集的分析器指定为搜索时分析器，也可以指定为索引时分析器。但记住，选择哪种方式主要取决于你的业务需求和对数据灵活性的考虑。
7、同义词相关企业级实战问题清单
如下问题来自死磕Elasticsearch知识星球2018——2023年的真实企业级问题。
7.1 问题1：开源同义词库推荐
大家有做过同义词功能的吗，同义词都是手工添加的吗？有没有开源的，可以直接拿来用的，不用很复杂，就是我们平时理解的同义词就行？
回复：推荐还是自己构建吧，否则在查询的会出现很多莫名其妙的问题。
同义词开源库：
https://github.com/fighting41love/funNLP/blob/master/data/同义词库、反义词库、否定词库/同义词库.txt
7.2 问题2：关于历史数据不生效的问题？
大神，咨询个问题：es中加同义词和自定义分词之后，对于历史数据不生效的问题，如果处理？
分词：我确认必须reindex才生效，同义词我认为原理一样（我没有验证，但你可以试一下）
原理：数据再写入的时候会生成倒排索引，依据词典，词典更新发生在写入之前，所以不可以。
铭毅回复——一般操作：
- 1,尽量提前找全词;
- 2,更新词典发生在业务不忙的时候，比如凌晨;
- 3,更新词典，对新写入数据立即生效，对老数据，必须reindex操作，为保障线上业务正常访问，务必使用别名。
7.3 问题3：关于检索方案相关？
请问存储的是代码，但是搜索的时候代码及代码对应的中文都能搜索到数据是否能做到。
比如有个HY_DM字段存储的是行业代码:
如01 02 03，01对应第一产业，02、03类似，在搜索时搜索 “01”可以命中这个数据，在搜索“第一产业”时也能命中这个数据。
主要考虑的是如果同时存储代码和对应中文解释，占空间会比较大，我目前考虑同义词可能是一种方式，但是有错误命中的可能，比如在另一个代码中也是编码01，我搜索“第一产业”也命中了。
铭毅回复：同义词或者还可以考虑写入前数据建模，建模两个字段 两个字段做了一一对应关系。
现在看用 同义词 API 完全可以搞定。
8、小结
管理你的搜索体验中的同义词从未如此简单！与其使用文件并更新每个文件和相关的索引分析器，不如现在使用新的同义词API来定义同义词，并通过自动重新加载所需的分析器来更新它们。赶快试试看吧！
虽然同义词是一个非常强大的工具，但在实施时需要注意以下几点：
- 维护同义词库需要时间和努力。随着时间的推移，术语和用法可能会发生变化，同义词库需要定期更新。
- 过多的同义词可能导致搜索结果变得不准确。需要权衡准确性和搜索的广度。
总的来说，同义词是Elasticsearch中一个强大的特性，可以显著增强搜索的质量和用户体验，但需要谨慎维护和使用。
参考
- https://www.elastic.co/guide/en/elasticsearch/reference/8.10/put-synonyms-set.html
- https://t.zsxq.com/13QIUCLN4
- https://www.elastic.co/cn/blog/update-synonyms-elasticsearch-introducing-synonyms-api
- https://github.com/elastic/elasticsearch/pull/97962
作者:铭毅天下
来源:微信公众号:铭毅天下Elasticsearch
出处:https://mp.weixin.qq.com/s/4dCRJr1sS-10iMOuNMtFLA
2.出口动物源食品中氢氯噻嗪等10种利尿剂残留量的测定
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN/ T 5167—2019
出口动物源食品中氢氯噻嗪等 10 种 利尿剂残留量的测定 液相色谱 – 质谱 / 质谱法Determination of 10 diuretic residues including hydrochlorothiazide et al in animal-origin foodstuffs for export — LC-MS / MS method
2019-10-25 发布 2020-05-01 实施
中 华 人 民 共 和 国 海 关 总 署 发 布
ICS 67.050
C 53
I
SN / T 5167—2019
前 言
本标准按照 GB / T 1.1— 2009 给出的规则起草。
本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口。
本标准起草单位：中华人民共和国武汉海关、湖北省食品质量安全监督检验研究院。
本标准主要起草人：赵晓亚、范志勇、叶诚、王鹏、尚吟竹、王晗、罗静、王振华、付晓芳、
李晶。
1
SN / T 5167—2019
出口动物源食品中氢氯噻嗪等 10 种利尿剂残留量的测定
液相色谱 – 质谱 / 质谱法
1 范围
本标准规定了出口动物源食品中氢氯噻嗪、氯噻嗪、氨苯喋啶、丙磺舒、氯噻酮、乙酰唑胺、
呋塞米、精磺胺、螺内酯、坎利酮残留量的液相色谱 – 质谱 / 质谱的测定方法。
本标准适用于猪肉、牛肉、羊肉、牛奶和鸡蛋中氢氯噻嗪、氯噻嗪、氨苯喋啶、丙磺舒、氯噻
酮、乙酰唑胺、呋塞米、精磺胺、螺内酯、坎利酮残留量的测定，其他食品也可参照使用。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB / T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
3 方法提要
试样经均质处理后，称取适量加入磷酸二氢钾，用乙腈提取，经分散固相萃取方法净化，液
相色谱 – 质谱 / 质谱仪测定，外标法定量。
4 试剂和材料
除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为 GB / T 6682 规定的一级水。
4.1 甲酸（HCOOH，CAS 号：64-18-6）。
4.2 甲醇（CH3OH，CAS 号：67-56-1）：色谱纯。
4.3 乙腈（CH3CN，CAS 号：75-05-8）：色谱纯。
4.4 磷酸二氢钾（KH2PO4，CAS 号：7778-77-0）。
4.5 无水硫酸镁（MgSO4，CAS 号：7487-88-9）。
4.6 0.1% 甲酸甲醇溶液：准确移取 1.0 mL 甲酸（4.1），用甲醇（4.2）定容至 1 000 mL。
4.7 水 -0.1% 甲酸甲醇溶液（70 ： 30，v / v）：移取 30 mL 0.1% 甲酸甲醇溶液（4.6）和 70 mL 水，混匀。4.8 标准物质：坎利酮、螺内酯、氢氯噻嗪、氯噻嗪、乙酰唑胺、呋塞米、精磺胺、丙磺舒、氨苯
喋啶和氯噻酮标准物质的纯度均≥ 98%，标准物质的化合物信息参见附录 A。
4.9 标准储备液：称取适量标准物质（4.8）（精确至 0.000 01 g），分别用甲醇（4.2）溶解，配制成
浓度为 0.5 mg / mL 标准储备液，于 -18 ℃ 以下保存，有效期 3 个月。4.10 混合标准中间液：用甲醇（4.2）将各标准储备液混合，稀释成氢氯噻嗪、氯噻嗪、氨苯喋啶、
丙磺舒、氯噻酮的 1.0 μg / mL 混合标准中间液和乙酰唑胺、呋塞米、精磺胺、螺内酯、坎利酮的 1.0 μg / mL的混合标准中间液，于 0 ℃~4 ℃ 保存，有效期 1 个月。4.11 基质混合标准工作液：准确吸取一定量的混合标准中间液（4.10），用空白基质溶液逐级稀释
成氢氯噻嗪、氯噻嗪、氨苯喋啶、丙磺舒、氯噻酮浓度为 5.0 μg / L、10.0 μg / L、20.0 μg / L、50.0 μg / L、
2
SN / T 5167—2019
100.0 μg / L和乙酰唑胺、呋塞米、精磺胺、螺内酯、坎利酮浓度为10.0 μg / L、20.0 μg / L、50.0 μg / L、100.0 μg / L、200.0 μg / L 的基质混合标准工作液，现用现配。4.12 乙二胺 -N- 丙基硅烷化硅胶（PSA）：40 μm~60 μm。4.13 十八烷基硅烷键合硅胶（C18）：40 μm~60 μm。4.14 石墨化碳黑（GCB）：40 μm~120 μm。4.15 微孔滤膜：有机系，0.22 μm。
5 仪器与设备
5.1 液相色谱 – 质谱 / 质谱仪：配电喷雾离子源（ESI）。
5.2 组织捣碎机。
5.3 振荡器。
5.4 涡旋混合器。
5.5 分析天平：感量为 0.000 01 g 和 0.01 g。
5.6 冷冻离心机：10 000 r / min。
5.7 氮气吹干仪。
6 试样制备与保存
6.1 试样制备
6.1.1 猪肉、牛肉、羊肉
猪肉、牛肉、羊肉各约 500 g，放入组织捣碎机均质，充分混匀，均分成 2 份，分别装入清洁容
器内，并标明标记。
6.1.2 鸡蛋
取 16 枚新鲜鸡蛋（约 1 kg），洗净、去壳后充分混匀，均分成 2 份，分别装入清洁容器内，并标
明标记。
6.1.3 牛奶
将牛奶从冰箱中取出，放置至室温、摇匀，备用。
制样操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。
6.2 试样保存
猪肉、牛肉、羊肉、鸡蛋试样于 -20 ℃ 以下条件下保存；牛奶试样置于 0 ℃~4 ℃ 条件下保存。
7 测定步骤
7.1 提取
称取约 2 g 试样（精确至 0.01 g）置于 50 mL 离心管中，加入 10 mL 乙腈（4.3）和 2 g 磷酸二氢
钾（4.4），振荡提取 30 min 后，于 0 ℃ 以 9 000 r / min 的转速离心 5 min，取出上清液，再加入 10 mL乙腈（4.3）重复提取 1 次，离心后合并上清液于 50 mL 离心管中，待净化。
3
SN / T 5167—2019
7.2 净化
在 7.1 中的待净化上清液中加入 150 mg 无水硫酸镁（4.5）、50 mg PSA（4.12）、50 mg C18（4.13）、
7.5 mg GCB（4.14），涡旋混合 30 s 后，于 0 ℃ 以 9 000 r / min 离心 5 min，取全部上清液，于 45 ℃下用氮气吹至近干，准确加入 2.0 mL 水 -0.1% 甲酸甲醇溶液（4.7）溶解残渣，过 0.22 μm 微孔滤膜
（4.15），供液相色谱 – 质谱 / 质谱仪测定。
7.3 空白基质提取液
取经测定不含被测组分的试样按 7.1 和 7.2 操作，获得空白基质提取液。
7.4 测定
7.4.1 液相色谱条件
7.4.1.1 色谱柱：C18 色谱柱，150 mm×2.1 mm（内径），粒径 3.5 μm 或性能相当者。7.4.1.2 柱温：30 ℃。7.4.1.3 流动相：A 为水，B 为 0.1% 甲酸甲醇溶液（4.6），梯度洗脱，洗脱程序见表 1。
表 1 液相色谱的梯度洗脱程序
时间 / min 流动相 A / % 流动相 B / %
0.00 90 10
1.00 90 10
3.5 35 65
11 3 97
11.5 90 10
15 90 10
7.4.1.4 流速：0.3 mL / min。
7.4.1.5 进样量：5 μL。
7.4.2 正离子扫描模式质谱条件
7.4.2.1 离子源：电喷雾离子源（ESI）。
7.4.2.2 扫描方式：正离子扫描。
7.4.2.3 检测方式：多反应监测（MRM）。
7.4.2.4 雾化气、气帘气、辅助气、碰撞气均为高纯氮气及其他适合气体，使用前应调节各气体流
量以使质谱灵敏度达到检测要求，喷雾电压、去簇电压、碰撞气能量等参数值应优化至最佳灵敏度，
参考质谱参数参见附录 B。
7.4.3 负离子扫描模式质谱条件
7.4.3.1 离子源：电喷雾离子源（ESI）。
7.4.3.2 扫描方式：负离子扫描。
4
SN / T 5167—2019
7.4.3.3 检测方式：多反应监测（MRM）。
7.4.3.4 雾化气、气帘气、辅助加热气、碰撞气均为高纯氮气及其他适合气体，使用前应调节各气
体流量以使质谱灵敏度达到检测要求，喷雾电压、去簇电压、碰撞气能量等参数值应优化至最佳灵敏
度，其他参考质谱参数参见附录 B。
7.4.4 液相色谱 – 质谱 / 质谱测定
7.4.4.1 定性测定
按照液相色谱 – 质谱 / 质谱条件测定试样和基质混合标准工作液，试样中目标化合物的保留时间
与基质混合标准工作液中对应化合物的保留时间偏差在 ±2.5% 之内；定性离子对的相对丰度与浓度相当的基质混合标准工作液的相对丰度一致，相对丰度偏差不超过表 2 的规定，且每个离子的信噪比
均≥ 3，则可判断试样中存在相应的被测物。
表 2 定性离子对相对丰度的最大允许偏差
相对离子丰度 / % >50 20~50（含） 10~20（含） ≤ 10
允许的相对偏差 / % ±20 ±25 ±30 ±50
7.4.4.2 定量测定
将基质混合标准工作液和试样溶液依次注入液相色谱 – 质谱 / 质谱仪中，测得定量离子峰面积。
待测样液中利尿剂的响应值均应在仪器检测的定量线性响应范围内。在上述仪器条件下，10 种利尿
剂的提取离子色谱图参见附录 C。
7.5 空白试验
除不加试样外，均按上述测定条件和步骤进行。
8 结果计算和表述
采用基质匹配标准工作曲线定量，试样中被测物的含量由液相色谱 – 质谱 / 质谱仪的数据处理软
件或按式（1）计算，计算结果应扣除空白值。
……………………………（1）
式中：Xi——试样中被测组分残留量，单位为微克每千克（μg / kg）；ci ——由基质匹配标准工作曲线得到的样液中待测组分的浓度，单位为微克每升（μg / L）；V ——试样最终定容体积，单位为毫升（mL）；m——最终定容体积试样溶液所代表试样的质量，单位为克（g）。注：结果保留 3 位有效数字。
5
SN / T 5167—2019
9 检出限、定量限和回收率
9.1 检出限和定量限
猪肉、牛肉、羊肉、鸡蛋、牛奶中氢氯噻嗪、氯噻嗪、氨苯喋啶、丙磺舒、氯噻酮的检出限为
2.00 μg / kg，定量限为 5.00 μg / kg ；乙酰唑胺、呋塞米、精磺胺、螺内酯、坎利酮的检出限为 5.00 μg / kg，定量限为 10.0 μg / kg。
9.2 回收率
猪肉、牛肉、羊肉、鸡蛋、牛奶中 10 种利尿剂的添加水平和回收率数据参见附录 D。
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附 录 A
（资料性附录）
10 种利尿剂的化合物信息
表 A.1 10 种利尿剂的化合物信息
化合物 英文名称 CAS 号 化学式 相对分子质量
氢氯噻嗪 hydrochlorothiazide 58-93-5 C7H8ClN3O4S2 297.74
氯噻嗪 chlorothiazide 58-94-6 C7H6ClN3O4S2 295.72
氨苯喋啶 triamterene 396-01-0 C12H11N7 253.26
丙磺舒 probenecid 57-66-9 C13H19NO4S 285.36
氯噻酮 chlorthalidone 66258-76-2 C23H29N5O8S 535.57
乙酰唑胺 acetazolamide 59-66-5 C4H6N4O3S2 222.25
呋塞米 furosemide 54-31-9 C12H11ClN2O5S 330.74
精磺胺 4-amino-6-chlorobenzene-1,3-disulfonamide 121-30-2 C6H8ClN3O4S2 285.73
螺内酯 spironolactone 52-01-7 C24H32O4S 416.57
坎利酮 canrenone 976-71-6 C22H28O3 340.46
7
SN / T 5167—2019
附 录 B
（资料性附录）a 质谱参考参数 1）
B.1 正离子扫描模式参考质谱条件
B.1.1 电喷雾电压（IS）：5 000 V。
B.1.2 气帘气压力（CUR，kPa）：241（氮气）。
B.1.3 雾化气压力（GS1，kPa）：414（氮气）。
B.1.4 辅助气压力（GS2，kPa）：355（氮气）。
B.1.5 碰撞电压（CE）、去簇电压（DP）见表 B.1。
B.2 负离子扫描模式参考质谱条件
B.2.1 电喷雾电压（IS）：-4 500 V。
B.2.2 气帘气压力（CUR，kPa）：241（氮气）。
B.2.3 雾化气压力（GS1，kPa）：414（氮气）。
B.2.4 辅助气压力（GS2，kPa）：355（氮气）。
B.2.5 碰撞电压（CE）、去簇电压（DP）见表 B.1。
B.3 10 种利尿剂的主要参考质谱参数
详见表 B.1。
1） 非商业性声明：本标准中所列参数是在 AB SCIEX 5500 质谱仪完成的，此处列出试验用仪器型号仅是为了提供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试不同厂家和型号仪器。
表 B.1 10 种利尿剂的主要参考质谱参数
序号 化合物名称 母离子（m / z） 扫描模式 子离子（m / z） 去簇电压（DP） / V 碰撞气能量（CE ） / eV
1 氢氯噻嗪 296.0 ESI- 269.0*
-120-27
205.0 -30
2 氯噻嗪 294.0 ESI- 214.2*
-100-35
179.0 -55
3 氨苯喋啶 254.2 ESI+ 237.0*
12035
168.2 46
4 丙磺舒 286.2 ESI+ 201.9*
12020
120.9 33
5 氯噻酮 337.0 ESI- 145.9*
-120-40
189.9 -22
6 乙酰唑胺 221.0 ESI+ 83.1*
-50-25
58.1 -20
7 呋塞米 329.1 ESI- 285.2*
-35-20
205.0 -30
8 精磺胺 284.1 ESI- 205.0*
-80-30
169.1 -30
9 螺内酯 341.1 ESI+ 187.2*
15030
107.1 35
10 坎利酮 341.1 ESI+ 187.2*
15030
107.1 35
注：* 表示定量离子对。
8
SN / T 5167—2019
附 录 C
（资料性附录）
标准物质的提取离子色谱图
氢氯噻嗪
氢氯噻嗪
氯噻嗪
氯噻嗪
氨苯喋啶
氨苯喋啶
丙磺舒
丙磺舒
氯噻酮
a）
b）
c）
d）
e）
f）
g）
h）
i）
图 C.1 10 种利尿剂标准溶液的提取离子色谱图（5.0 ng / mL）
9
SN / T 5167—2019
图 C.1 （续）
氯噻酮
乙酰唑胺
乙酰唑胺
呋塞米
呋塞米
精磺胺
精磺胺
螺内酯
螺内酯
坎利酮
坎利酮
j）
k）
l）
m）
n）
o）
p）
q）
r）
10
SN / T 5167—2019
表 D.1 10 种利尿剂在猪肉中的添加水平及其回收率
化合物 添加水平 / （μg / kg） 回收率范围 / % 相对标准偏差 / %
氢氯噻嗪
5.00 81.2~98.1 7.42
10.0 74.6~93.5 8.93
50.0 78.4~93.7 6.84
氯噻嗪
5.00 80.2~99.4 7.66
10.0 80.2~99.7 7.58
50.0 76.5~99.6 10.4
氨苯喋啶
5.00 80.4~103.0 10.1
10.0 83.4~108.0 9.34
50.0 78.7~99.1 8.76
丙磺舒
5.00 78.8~95.7 7.62
10.0 80.3~98.6 7.89
50.0 74.4~98.8 9.93
氯噻酮
5.00 80.3~ 98.7 7.01
10.0 76.9~95.8 9.02
50.0 81.0~97.8 6.10
乙酰唑胺
10.0 72.5~96.7 10.7
20.0 81.2~98.9 6.54
100.0 79.5~98.9 7.93
呋塞米
10.0 75.9~98.7 9.60
20.0 85.6~105.0 7.46
100.0 73.3~96.8 10.1
精磺胺
10.0 83.3 ~101.0 7.16
20.0 81.3~98.2 6.92
100.0 80.2~101.0 8.57
螺内酯
10.0 79.4~99.1 8.26
20.0 75.8~96.6 9.29
100.0 78.8~93.5 7.03
坎利酮
10.0 75.3~93.1 8.63
20.0 75.6~92.5 7.67
100.0 78.9~98.8 8.69
附 录 D
（资料性附录）
添加水平及回收率数据
11
SN / T 5167—2019
表 D.2 10 种利尿剂在牛肉中的添加水平及其回收率
化合物 添加水平 / （μg / kg） 回收率范围 / % 相对标准偏差 / %
氢氯噻嗪
5.00 77.2~95.8 8.34
10.0 78.6~92.3 7.07
50.0 80.6~98.6 7.37
氯噻嗪
5.00 80.9~108.3 10.6
10.0 81.6 ~104.1 9.35
50.0 83.6~102.4 7.15
氨苯喋啶
5.00 79.8~101.0 10.5
10.0 78.6~101.9 10.2
50.0 85.6~98.3 5.22
丙磺舒
5.00 73.5~95.6 9.32
10.0 80.3~96.6 7.24
50.0 81.3~99.1 7.35
氯噻酮
5.00 75.6~96.6 9.15
10.0 79.8~98.6 8.33
50.0 82.3~98.7 7.35
乙酰唑胺
10.0 78.9~96.5 8.04
20.0 81.6~95.2 5.76
100.0 80.3~92.1 5.96
呋塞米
10.0 80.3~98.7 7.03
20.0 74.3~95.2 8.66
100.0 80.6~95.8 5.85
精磺胺
10.0 80.6~98.6 7.22
20.0 77.9~95.3 7.17
100.0 80.3~99.4 7.67
螺内酯
10.0 78.8~98.5 8.27
20.0 78.4~ 99.8 9.47
100.0 80.4~96.1 6.69
坎利酮
10.0 71.3~ 98.5 11.8
20.0 77.5~99.1 10.0
100.0 80.2~98.8 8.75
12
SN / T 5167—2019
表 D.3 10 种利尿剂在羊肉中的添加水平及其回收率
化合物 添加水平 / （μg / kg） 回收率范围 / % 相对标准偏差 / %
氢氯噻嗪
5.00 78.8~98.1 8.68
10.0 72.5~94.7 10.8
50.0 79.2~96.5 6.52
氯噻嗪
5.00 80.3~ 98.9 8.03
10.0 76.4~97.8 9.21
50.0 71.2~98.7 11.3
氨苯喋啶
5.00 80.6~101.5 8.15
10.0 85.1~101.0 7.48
50.0 80.7~99.2 8.20
丙磺舒
5.00 75.9~ 101.1 11.2
10.0 72.4~95.5 9.28
50.0 81.2~98.7 6.52
氯噻酮
5.00 81.3~ 99.4 7.40
10.0 79.7~98.5 8.32
50.0 82.3~99.7 6.70
乙酰唑胺
10.0 72.7~95.8 10.0
20.0 79.1~100.8 8.38
100.0 80.9~99.8 8.86
呋塞米
10.0 75.6~98.7 8.91
20.0 72.3~93.1 9.39
100.0 76.8~ 91.7 6.18
精磺胺
10.0 75.4~93.3 8.62
20.0 76.4~104.2 10.1
100.0 71.5~97.5 11.4
螺内酯
10.0 79.8~103.5 9.92
20.0 72.6~98.9 11.0
100.0 80.6~98.8 7.09
坎利酮
10.0 75.3~95.6 8.16
20.0 82.3~ 99.7 7.48
100.0 75.3~96.8 8.87
13
SN / T 5167—2019
表 D.4 10 种利尿剂在鸡蛋中的添加水平及其回收率
化合物 添加水平 / （μg / kg） 回收率范围 / % 相对标准偏差 / %
氢氯噻嗪
5.00 73.2~101.3 13.0
10.0 78.9~98.5 7.96
50.0 71.3~94.2 9.25
氯噻嗪
5.00 75.6~101.0 11.6
10.0 75.4~101.7 10.5
50.0 84.1~108.5 8.49
氨苯喋啶
5.00 78.3~105.0 11.6
10.0 75.3~104.6 11.1
50.0 76.6~102.0 9.49
丙磺舒
5.00 79.8~96.6 7.86
10.0 80.5~95.6 6.60
50.0 80.3~96.5 6.55
氯噻酮
5.00 75.2~94.3 9.27
10.0 74.3~92.2 8.39
50.0 79.1~98.9 8.64
乙酰唑胺
10.0 75.4~95.6 8.78
20.0 80.2~98.6 7.51
100.0 82.3~99.7 6.83
呋塞米
10.0 71.3~102.3 12.7
20.0 83.0~104.0 9.38
100.0 76.5~108.7 10.2
精磺胺
10.0 73.8~98.4 9.98
20.0 77.6~99.4 9.38
100.0 72.0~98.8 10.4
螺内酯
10.0 76.9~103.9 12.5
20.0 72.2~97.7 10.4
100.0 73.7~98.8 9.42
坎利酮
10.0 73.4~97.4 10.8
20.0 70.8~91.3 9.36
100.0 73.6~101.2 12.1
14
SN / T 5167—2019
表 D.5 10 种利尿剂在牛奶中的添加水平及其回收率
化合物 添加水平 / （μg / kg） 回收率范围 / % 相对标准偏差 / %
氢氯噻嗪
5.00 72.4~103.1 13.0
10.0 78.8~100.6 9.93
50.0 74.3~91.3 9.15
氯噻嗪
5.00 71.3~103.5 12.1
10.0 80.8~100.6 9.65
50.0 78.9~99.4 8.61
氨苯喋啶
5.00 71.5~105.7 13.2
10.0 78.7~106.0 12.4
50.0 74.8~105.0 13.0
丙磺舒
5.00 77.6~101.5 10.6
10.0 73.6~94.3 8.96
50.0 75.4~93.3 7.85
氯噻酮
5.00 78.9~101.3 9.23
10.0 72.2~93.2 8.63
50.0 78.6~103.5 9.95
乙酰唑胺
10.0 78.8~105.3 11.2
20.0 75.5~95.4 8.75
100.0 72.2~96.2 9.66
呋塞米
10.0 79.8~99.7 9.74
20.0 79.7~98.8 8.48
100.0 78.5~102.9 8.93
精磺胺
10.0 74.4~100.3 11.3
20.0 75.4~ 96.7 9.23
100.0 73.1~99.7 10.7
螺内酯
10.0 73.3~96.4 10.2
20.0 74.5~98.2 10.9
100.0 80.2~99.5 9.17
坎利酮
10.0 75.9~95.3 9.51
20.0 73.6~101.3 11.5
100.0 78.6~103.4 9.22
15
SN / T 5167—2019
Foreword
This standard was drafted according to GB / T 1.1— 2009.
This standard was proposed by and under the charge of General Administration of Customs, P. R. China.
This standard was drafted by Wuhan Customs District P. R. China, Hubei Provincial Institute for Food
Supervision and Test.
This standard was mainly drafted by Zhao Xiaoya, Fan Zhiyong, Ye Cheng, Wang Peng, Shang Yinzhu, Wang
Han, Luo Jing, Wang Zhenhua, Fu Xiaofang, Li Jing.
17
SN / T 5167—2019
Determination of 10 diuretic residues including hydrochlorothiazide
et al in animal—origin foodstuffs for export -LC-MS / MS method
1 Scope
This standard specifies the method of determination of hydrochlorothiazide, chlorothiazide, triamterene,
probenecid, chlorthalidone, acetazolamide, furosemide, 4-amino-6-chlorobenzene-1,3-disulfonamide,
spironolactone and canrenone residues in animal-origin foodstuffs for export— LC-MS / MS.
This standard is applicable to the determination of hydrochlorothiazide, chlorothiazide, triamterene, probenecid,
chlorthalidone, acetazolamide, furosemide, 4-amino-6-chlorobenzene-1,3-disulfonamide, spironolactone and
canrenone residues in pork, beef, mutton, eggs and milk for export. Other foods may be also tested by consulting
this standard.
2 Normative references
The following documents are necessary for this standard. For dated reference， only dated editions shall apply
to this standard. For undated reference， the latest edition of the normative document （including subsequent
amendments） referred to applies.
GB / T 6682 Water for analytical laboratory use-Specification and test methods
3 Principle
Add potassium dihydrogen phosphate to the test sample, the contents of hydrochlorothiazide, chlorothiazide, triamterene,
probenecid, chlorthalidone, acetazolamide, furosemide, 4-amino-6-chlorobenzene-1,3-disulfonamide,
spironolactone and canrenone are extracted with acetonitrile. Thereafter being cleaned up by the dispersive solid phase
extraction, the contents are determined by LC-MS / MS, quantified by external standard method.
4 Reagents and materials
Unless otherwise specified, all reagents used should be of analytically pure， "water" is the first grade water
prescribed by GB / T 6682.
4.1 Formic acid （HCOOH, CAS No. : 64-18-6）.
4.2 Methanol（CH3OH, CAS No. : 67-56-1）: chromatography pure.
4.3 Acetonitrile （CH3CN, CAS No. : 75-05-8）: chromatography pure.
4.4 Potassium dihydrogen phosphate（KH2PO4, CAS No. : 7778-77-0）.
4.5 Magnesium sulfate（MgSO4, CAS No. : 7487-88-9）.
4.6 0.1% formic acid methanol solution: pipette 1.0 mL formic acid（4.1） dilute to 1 000 mL with methanol（4.2）.
4.7 Water-0.1% formic acid methanol solution（70 : 30, v / v）: volume 70 mL water and 30 mL 0.1% formic
acid methanol solution（4.6）, mix to homogenous.
4.8 Standards of ten 10 diuretic including hydrochlorothiazide etc. : purity ≥ 98%, the information of 10 diuretics
18
SN / T 5167—2019
are listed in annex A.
4.9 Standard stock solution: accurately weigh appropriate standards（4.8）, dissolve and quantitatively with
methanol（4.2）. The concentration of the solution is 0.5 mg / mL. The stock solution should be stored at the
temperature below -18 ℃ for less than 3 months.4.10 Mixed standard solution: dilute standard stock solution of hydrochlorothiazide, chlorothiazide,
triamterene, probenecid and chlorthalidone with methanol （4.2） to obtain 1.0 μg / mL concentration of the mixed standard solution. Dilute standard stock solution of acetazolamide, furosemide, 4-amino-6-
chlorobenzene-1,3-disulfonamide, spironolactone and canrenone with methanol（4.2）to obtain 1.0 μg / mL concentration of the mixed standard solution. The mixed standard solution should be stored at 0 ℃~4 ℃ for less than 1 month.
4.11 Matrix matched mixed standard working solution: accurately measure mixed standard solution of
hydrochlorothiazide, chlorothiazide, triamterene, probenecid and chlorthalidone with blank sample extract to
obtain 5.0 μg / L, 10.0 μg / L, 20.0 μg / L, 50.0 μg / L, 100.0 μg / L concentration of matrix matched mixed standard working solution. Accurately measure mixed standard solution of acetazolamide, furosemide, 4-amino-6-
chlorobenzene-1,3-disulfonamide, spironolactone and canrenone with blank sample extract to obtain 10.0 μg / L, 20.0 μg / L, 50.0 μg / L, 100.0 μg / L, 200.0 μg / L concentration of matrix matched mixed standard working solution.
4.12 PSA: 40 μm~60 μm.4.13 C18: 40 μm~60 μm.4.14 GCB: 40 μm~120 μm.4.15 Membrane: organic, 0.22 μm.
5 Apparatus and equipment
5.1 High performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry ： equipped with electrospray
ionization source （ESI）.
5.2 Tissue blender.
5.3 Oscillator.
5.4 Vortex mixer.
5.5 Analytical balance: accurate to 0.000 01 g and 0.01 g.
5.6 Refrigerated centrifuge: 10 000 r / min.
5.7 Nitrogen evaporator.
6 Sample preparation and storage
6.1 Preparation of test sample
6.1.1 Pork, beef, mutton
Take approximately 500 g of representative sample of pork, beef or mutton in a tissue blender, mix thoroughly,
pide into two portions and placed into a clean container, sealed and labeled.
19
SN / T 5167—2019
6.1.2 Eggs
Take the edible part for 16 eggs（approximately 1 000 g） blended in a tissue blender, mix thoroughly, pide
into two portions and placed into a clean container, sealed and labeled.
6.1.3 Milk
Warm the milk sample to room temperature, mix thoroughly.
In the course of sampling and sample preparation, precautions must be taken to avoid the contamination or any
factors which may cause the change of residues content.
6.2 Storage of test sample
The sample of pork, beef, mutton and eggs should be stored below -20 ℃. The sample of milk should be stored at 0 ℃~4 ℃.
7 Procedure
7.1 Extraction
Weigh 2 g（accurate to 0.01 g） of the test sample into a 50 mL centrifuge tube, add 10 mL acetonitrile
（4.3） and 2 g potassium dihydrogen phosphate（4.4）, extract with vibrating 30 min. Then centrifuge for
5 min at 0 ℃ and 9 000 r / min. The supernatant is taken into a 50 mL centrifuge tube. Another 10 mL acetonitrile（4.3） is added and the mixture was extracted again. Combine the supernatant into the same 50
mL centrifuge tube. The supernatant is ready for cleanup.
7.2 Cleanup
Add 150 mg magnesium sulfate（4.5）, 50 mg PSA （4.12）, 50 mg C18（4.13）, 7.5 mg GCB （4.14）to the
supernatant in 7.1, mix-vortexing for 30 s, centrifuge for 5 min at 0 ℃ and 9 000 r / min. The supernatant is evaporated to near dryness at 45 ℃ under a stream of nitrogen, then 2.0 mL water-0.1% formic acid methanol solution（4.7）is added to reconstitute the residue. After being filtrated with a 0.22 μm organic membrane（4.15）, the final solution is ready for analysis by LC-MS / MS.
7.3 Blank matrix extract
Weigh the sample determined without 10 diuretics, blank matrix extract is obtained after procedure of 7.1 and 7.2.
7.4 Determination
7.4.1 LC operating conditions
7.4.1.1 LC column: C18 LC column（150 mm× 2.1 mm i.d.），3.5 μm or equivalent.7.4.1.2 Column temperature: 30 ℃.7.4.1.3 Mobile phase: A is water, B is 0.1% formic acid methanol solution（4.6），the grade of mobile phase
is listed in table 1.
20
SN / T 5167—2019
Table 1 Grade of mobile phase
Time / min Mobile phase A / % Mobile phase B / %
0.00 90 10
1.00 90 10
3.5 35 65
11 3 97
11.5 90 10
15 90 10
7.4.1.4 Flow rate: 0.3 mL / min.
7.4.1.5 Injection volume: 5 μL.
7.4.2 Positive ion scanning model MS / MS operating conditions
7.4.2.1 Ion source: electrospray ionization source （ESI）.
7.4.2.2 Scanning model: positive ion.
7.4.2.3 Monitoring model: multiple reaction monitor（MRM）.
7.4.2.4 Nebulizer gas, curtain gas and auxiliary gas are high purity nitrogen or other suitable gases. They are
optimized by adjusting the gas flow parameters. Ion spray voltage, deflector voltage, collision energy and so on
should be optimized to reach the highest sensitive of mass spectrometer, referenced conditions are showed in
annex B.
7.4.3 Negative ion scanning model MS / MS operating conditions
7.4.3.1 Ion source: electrospray ionization sourse （ESI）.
7.4.3.2 Scanning model: negative ion.
7.4.3.3 Monitoring model: multiple reaction monitor（MRM）.
7.4.3.4 Nebulizer gas, curtain gas and auxiliary gas are optimized by adjusting the gas flow parameters. Ion
spray voltage, deflector voltage, collision energy and so on should be optimized to reach the highest sensitive of
mass spectrometer, referenced conditions are showed in annex B.
7.4.4 LC-MS / MS determination
7.4.4.1 Confirmation
Under the LC-MS / MS operating conditions, the matrix matched mixed standard working solution and sample
solution are injected. If the retention times of sample chromatogram peaks are consistent with that of standard
solution with the difference less than ±2.5%. The relative intensities of sample transitions shall correspond to
those of standard solution transitions for confirmation. The concentration of standard solution should be the same
with those of sample solution. The signal-to-noise ratio of monitoring ions of sample should not lower than 3.
The permitted tolerances listed in table 2, then the corresponding analyte must be present in sample.
21
SN / T 5167—2019
Table 2 Maximum permitted tolerances relative ion intensities while confirmation
Relative intensity / % >50 20~50（inclusive） 10~20（inclusive） ≤ 10
Permitted tolerances / % ±20 ±25 ±30 ±50
7.4.4.2 Quantitation determination
Matrix matched standard working solution and sample solution are injected into LC-MS/MS to obtain the peak
area of quantitative ion. The responses of analyte in the matrix matched mixed standard working solution and
the sample solution should be within the linear range of the instrument detection. See MRM chromatogram of 10
diuretics in annex C.
7.5 Blank test
The operation of the blank test is the same as that described in the method of determination, but with the
omission of sample addition.
8 Calculation and expression of the result
Calculate the content of 10 diuretic residues in the test sample by LC-MS / MS data processor or according to
the followed formula （1） . The blank values should be deducted from the calculation result.
……………………………（1）
Where:Xi—— the residue content of 10 diuretics in the test sample, μg / kg. ci —— the concentration of 10 diuretics obtained from the standard working solution, μg / L.V —— the final volume of the sample solution, mL.m—— the corresponding mass of the test sample in the final sample solution, g.Note ： Three significant figures should be retained.
9 Limit of detection， quantification and recovery rate
9.1 Limit of detection and limit of quantification
In pork, beef, mutton, milk and eggs, the limit of detection（LOD）for hydrochlorothiazide, chlorothiazide,
triamterene, probenecid, chlorthalidone is 2.00 μg / kg, the limit of quantification（LOQ）is 5.00 μg / kg, the LOD for acetazolamide, furosemide, 4-amino-6-chlorobenzene-1,3-disulfonamide, spironolactone and
canrenone is 5.00 μg / kg, LOQ is 10.0 μg / kg.
9.2 Recovery rate
The fortifying concentration of 10 diuretics for each sample and the range of recovery are showed in annex D.
22
SN / T 5167—2019
Annex A
（Informative）
The information of 10 diuretics
Table A.1 Information of 10 diuretics
Name CAS Number Molecular formula Molecular weight
hydrochlorothiazide 58-93-5 C7H8ClN3O4S2 297.74
chlorothiazide 58-94-6 C7H6ClN3O4S2 295.72
triamterene 396-01-0 C12H11N7 253.26
probenecid 57-66-9 C13H19NO4S 285.36
chlorthalidone 66258-76-2 C23H29N5O8S 535.57
acetazolamide 59-66-5 C4H6N4O3S2 222.25
furosemide 54-31-9 C12H11ClN2O5S 330.74
4-amino-6-chlorobenzene-1,3-disulfonamide 121-30-2 C6H8ClN3O4S2 285.73
spironolactone 52-01-7 C24H32O4S 416.57
canrenone 976-71-6 C22H28O3 340.46
23
SN / T 5167—2019
Annex B
（Informative）aMS / MS condition1）
B.1 ESI+ MS / MS condition
B.1.1 IS: 5 000 V.
B.1.2 CUR（kPa）: 241（N2）.
B.1.3 GS1（kPa ）: 414（N2）.
B.1.4 GS2（kPa）: 355（N2）.
B.1.5 See CE and DP in table B.1.
B.2 ESI- MS / MS condition
B.2.1 IS: -4 500 V.
B.2.2 CUR（kPa）: 241（N2）.
B.2.3 GS1（kPa）: 414（N2）.
B.2.4 GS2（kPa）: 355（N2）.
B.2.5 See CE and DP in table B.1.
B.3 MS / MS condition
See in table B.1.
1） The parameters listed in this standard are completed in the ABSCIEX 5500 mass spectometer: This information is given for the convenience of users of this standard， and dose not mean approval of the product. If other equivalent products have the same effect， they can be used.
Table B.1 MS / MS condition
Number Compound Parent ion （m / z） Scanning model Daugther ion （m / z） DP / V CE / eV
1 hydrochlorothiazide 296.0 ESI- 269.0*
-120-27
205.0 -30
2 chlorothiazide 294.0 ESI- 214.2*
-100-35
179.0 -55
3 triamterene 254.2 ESI+ 237.0*
12035
168.2 46
4 probenecid 286.2 ESI+ 201.9*
12020
120.9 33
5 chlorthalidone 337.0 ESI- 145.9*
-120-40
189.9 -22
6 acetazolamide 221.0 ESI+ 83.1*
-50-25
58.1 -20
7 furosemide 329.1 ESI- 285.2*
-35-20
205.0 -30
84-amino-6-chlorobenzene-1,3-
disulfonamide284.1 ESI-
205.0*-80
-30
169.1 -30
9 spironolactone 341.1 ESI+ 187.2*
15030
107.1 35
10 canrenone 341.1 ESI+ 187.2*
15030
107.1 35
Note:"*"represents the quantitative ion.
24
SN / T 5167—2019
Annex C
（Informative）
MRM chromatograms of the standards
Figure C.1 MRM chromatograms of 10 diuretic（5.0 ng / mL）
hydrochlorothiazide
hydrochlorothiazide
chlorothiazide
chlorothiazide
triamterene
triamterene
probenecid
probenecid
chlorthalidone
a）
b）
c）
d）
e）
f）
g）
h）
i）
25
SN / T 5167—2019
Figure C.1 （continued）
spironolactone
spironolactone
canrenone
canrenone
chlorthalidone
acetazolamide
acetazolamide
furosemide
furosemide
4-amino-6-chlorobenzene-1,3-disulfonamide
4-amino-6-chlorobenzene-1,3-disulfonamide
j）
k）
l）
m）
n）
o）
p）
q）
r）
26
SN / T 5167—2019
Table D.1 Fortifying concentration and the range of recovery of 10 diuretics in pork
Compound Level / （μg / kg） Range of recovery / % RSD / %
Hydrochlorothiazide
5.00 81.2~98.1 7.42
10.0 74.6~93.5 8.93
50.0 78.4~93.7 6.84
Chlorothiazide
5.00 80.2~99.4 7.66
10.0 80.2~99.7 7.58
50.0 76.5~99.6 10.4
Triamterene
5.00 80.4~103.0 10.1
10.0 83.4~108.0 9.34
50.0 78.7~99.1 8.76
Probenecid
5.00 78.8~95.7 7.62
10.0 80.3~98.6 7.89
50.0 74.4~98.8 9.93
Chlorthalidone
5.00 80.3~ 98.7 7.01
10.0 76.9~95.8 9.02
50.0 81.0~97.8 6.10
Acetazolamide
10.0 72.5~96.7 10.7
20.0 81.2~98.9 6.54
100.0 79.5~98.9 7.93
Furosemide
10.0 75.9~98.7 9.60
20.0 85.6~105.0 7.46
100.0 73.3~96.8 10.1
4-amino-6-chlorobenzene-1,3-disulfonamide
10.0 83.3 ~101.0 7.16
20.0 81.3~98.2 6.92
100.0 80.2~101.0 8.57
Spironolactone
10.0 79.4~99.1 8.26
20.0 75.8~96.6 9.29
100.0 78.8~93.5 7.03
Canrenone
10.0 75.3~93.1 8.63
20.0 75.6~92.5 7.67
100.0 78.9~98.8 8.69
Annex D
（Informative）
The fortifying concentration and the range of recovery of 10 diuretics
27
SN / T 5167—2019
Table D.2 Fortifying concentration and the range of recovery of 10 diuretics in beef
Compound Level / （μg / kg） Range of recovery / % RSD / %
Hydrochlorothiazide
5.00 77.2~95.8 8.34
10.0 78.6~92.3 7.07
50.0 80.6~98.6 7.37
Chlorothiazide
5.00 80.9~108.3 10.6
10.0 81.6 ~104.1 9.35
50.0 83.6~102.4 7.15
Triamterene
5.00 79.8~101.0 10.5
10.0 78.6~101.9 10.2
50.0 85.6~98.3 5.22
Probenecid
5.00 73.5~95.6 9.32
10.0 80.3~96.6 7.24
50.0 81.3~99.1 7.35
Chlorthalidone
5.00 75.6~96.6 9.15
10.0 79.8~98.6 8.33
50.0 82.3~98.7 7.35
Acetazolamide
10.0 78.9~96.5 8.04
20.0 81.6~95.2 5.76
100.0 80.3~92.1 5.96
Furosemide
10.0 80.3~98.7 7.03
20.0 74.3~95.2 8.66
100.0 80.6~95.8 5.85
4-amino-6-chlorobenzene-1,3-disulfonamide
10.0 80.6~98.6 7.22
20.0 77.9~95.3 7.17
100.0 80.3~99.4 7.67
Spironolactone
10.0 78.8~98.5 8.27
20.0 78.4~ 99.8 9.47
100.0 80.4~96.1 6.69
Canrenone
10.0 71.3~ 98.5 11.8
20.0 77.5~99.1 10.0
100.0 80.2~98.8 8.75
28
SN / T 5167—2019
Table D.3 Fortifying concentration and the range of recovery of 10 diuretics in mutton
Compound Level / （μg / kg） Range of recovery / % RSD / %
Hydrochlorothiazide
5.00 78.8~98.1 8.68
10.0 72.5~94.7 10.8
50.0 79.2~96.5 6.52
Chlorothiazide
5.00 80.3~ 98.9 8.03
10.0 76.4~97.8 9.21
50.0 71.2~98.7 11.3
Triamterene
5.00 80.6~101.5 8.15
10.0 85.1~101.0 7.48
50.0 80.7~99.2 8.20
Probenecid
5.00 75.9~ 101.1 11.2
10.0 72.4~95.5 9.28
50.0 81.2~98.7 6.52
Chlorthalidone
5.00 81.3~ 99.4 7.40
10.0 79.7~98.5 8.32
50.0 82.3~99.7 6.70
Acetazolamide
10.0 72.7~95.8 10.0
20.0 79.1~100.8 8.38
100.0 80.9~99.8 8.86
Furosemide
10.0 75.6~98.7 8.91
20.0 72.3~93.1 9.39
100.0 76.8~ 91.7 6.18
4-amino-6-chlorobenzene-1,3-disulfonamide
10.0 75.4~93.3 8.62
20.0 76.4~104.2 10.1
100.0 71.5~97.5 11.4
Spironolactone
10.0 79.8~103.5 9.92
20.0 72.6~98.9 11.0
100.0 80.6~98.8 7.09
Canrenone
10.0 75.3~95.6 8.16
20.0 82.3~ 99.7 7.48
100.0 75.3~96.8 8.87
29
SN / T 5167—2019
Table D.4 Fortifying concentration and the range of recovery of 10 diuretics in eggs
Compound Level / （μg / kg） Range of recovery / % RSD / %
Hydrochlorothiazide
5.00 73.2~101.3 13.0
10.0 78.9~98.5 7.96
50.0 71.3~94.2 9.25
Chlorothiazide
5.00 75.6~101.0 11.6
10.0 75.4~101.7 10.5
50.0 84.1~108.5 8.49
Triamterene
5.00 78.3~105.0 11.6
10.0 75.3~104.6 11.1
50.0 76.6~102.0 9.49
Probenecid
5.00 79.8~96.6 7.86
10.0 80.5~95.6 6.60
50.0 80.3~96.5 6.55
Chlorthalidone
5.00 75.2~94.3 9.27
10.0 74.3~92.2 8.39
50.0 79.1~98.9 8.64
Acetazolamide
10.0 75.4~95.6 8.78
20.0 80.2~98.6 7.51
100.0 82.3~99.7 6.83
Furosemide
10.0 71.3~102.3 12.7
20.0 83.0~104.0 9.38
100.0 76.5~108.7 10.2
4-amino-6-chlorobenzene-1,3-disulfonamide
10.0 73.8~98.4 9.98
20.0 77.6~99.4 9.38
100.0 72.0~98.8 10.4
Spironolactone
10.0 76.9~103.9 12.5
20.0 72.2~97.7 10.4
100.0 73.7~98.8 9.42
Canrenone
10.0 73.4~97.4 10.8
20.0 70.8~91.3 9.36
100.0 73.6~101.2 12.1
30
SN / T 5167—2019
Table D.5 Fortifying concentration and the range of recovery of 10 diuretics in milk
Compound Level / （μg / kg） Range of recovery / % RSD / %
Hydrochlorothiazide
5.00 72.4~103.1 13.0
10.0 78.8~100.6 9.93
50.0 74.3~91.3 9.15
Chlorothiazide
5.00 71.3~103.5 12.1
10.0 80.8~100.6 9.65
50.0 78.9~99.4 8.61
Triamterene
5.00 71.5~105.7 13.2
10.0 78.7~106.0 12.4
50.0 74.8~105.0 13.0
Probenecid
5.00 77.6~101.5 10.6
10.0 73.6~94.3 8.96
50.0 75.4~93.3 7.85
Chlorthalidone
5.00 78.9~101.3 9.23
10.0 72.2~93.2 8.63
50.0 78.6~103.5 9.95
Acetazolamide
10.0 78.8~105.3 11.2
20.0 75.5~95.4 8.75
100.0 72.2~96.2 9.66
Furosemide
10.0 79.8~99.7 9.74
20.0 79.7~98.8 8.48
100.0 78.5~102.9 8.93
4-amino-6-chlorobenzene-1,3-disulfonamide
10.0 74.4~100.3 11.3
20.0 75.4~ 96.7 9.23
100.0 73.1~99.7 10.7
Spironolactone
10.0 73.3~96.4 10.2
20.0 74.5~98.2 10.9
100.0 80.2~99.5 9.17
Canrenone
10.0 75.9~95.3 9.51
20.0 73.6~101.3 11.5
100.0 78.6~103.4 9.22
SN /
T 51
67—
2019
中华人民共和国出入境检验检疫
中国海关出版社有限公司出版发行
北京市朝阳区东四环南路甲 1 号（100023）
编辑部：（010）65194257
网址 www. hgcbs. com. cn；www.hgbook vip.com
中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷
开本 880×1230 1 / 16 印张 2.25 字数 60 千字
2019 年 10 月第一版 2019 年 10 月第一次印刷
印数 1—500
书号：155175·9 定价 36.00 元
出口动物源食品中氢氯噻嗪等 10 种 利尿剂残留量的测定
液相色谱 – 质谱 / 质谱法
行 业 标 准
SN / T 5167-2019
SN / T 5167-2019
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3.「特医检测」特医食品中维生素B1、B2的测定
营养科技 lbyykj
工 程 师 介 绍
杨杰
杨凌职业技术学院食品生物技术
营养科技检测工程师
擅长特医食品中维生素B1、B2的测定
特医食品中维生素 B1、B2的测定
维生素B1。又叫硫胺素。保持循环、消化、神经和肌内正常功能；调整胃肠道的功能；构成脱羧酶的辅酶，参加糖的代谢；能预防脚气病。
维生素B2。又叫核黄素。核典素是体内许多重要辅酶类的组成成分，这些酶能在体内物质代谢过程中传递它还是蛋白质、糖、脂肪酸代谢和能量利用与组成所必需的物质。能促进生长发育，保护眼睛、皮肤的健康。
方法原理：
GB 5009. 84—2016
《食品安全国家标准 食品中维生素B1的测定》
GB 5413.12—2010
《食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中维生素B2的测定》
维生素B1、B2的测定原理
维生素B1：样品在稀盐酸介质中恒温水解、中和, 再酶解, 水解液用碱性铁氰化钾溶液衍生, 正丁醇萃取后, 经C18反相色谱柱分离, 用高效液相色谱 – 荧光检测器检测（Ex：375nm,Em：435nm）, 外标法定量。
维生素B2：样品在稀盐酸中恒温水解酶解，经C18反向色谱柱分离，用荧光检测器(Ex：462nm,Em：522nm)检测，外标法定量。
水溶性维生素的性质
溶解性：易溶于水，而不溶于苯、乙醚、氯仿等大多数有机溶剂；
酸碱稳定性：在酸性介质中稳定，即使加热也不破坏；但在碱性介质中不稳定，易于分解，特别在碱性条件下加热，可大部或全部破坏；
光热稳定性：它们易受空气、光、热、酶、金属离子等影响，VB2对光，特别是紫外线敏感，VC对氧、铜离子敏感，易被氧化。
水溶性维生素的提取
测定水溶生维生素时，一般都在酸性溶液中进行前处理。
VB1、VB2通常采用酸水解，或在经淀粉酶、木瓜蛋白酶等酶解作用，使结合态维生素游离出来，再将它们从食物中提取出来。
VC通常采用草酸或草酸-醋酸直接提取。
在一定浓度的酸性介质中，可以消除某些还原性杂质对维生素的破坏。
检测试样
试样：肠内营养混悬液
试剂和材料
除非另有说明, 本方法所用试剂均为分析纯, 水为GB/T6682规定的一级水。
正丁醇( CH3CH2CH2CH2OH)。
铁氰化钾[K3Fe(CN)6]。
氢氧化钠(NaOH)。
盐酸(HCl)。
乙酸钠(CH3COON a·3H2O)。
冰乙酸(CH3COOH) 。
甲醇(CH3OH) : 色谱纯。
五氧化二磷(P2O5) 或者氯化钙(CaCl2)。
木瓜蛋白酶:应不含维生素B1,酶活力≥3500U(活力单位)/mg。
淀粉酶: 应不含维生素B1,酶活力≥3700U/g
试剂配制
1 .铁氰化钾溶液(20g/L) :称取2g铁氰化钾, 用水溶解并定容至100mL,摇匀。临用前配制。
2 .氢氧化钠溶液(100g/L) :称取25g氢氧化钠, 用水溶解并定容至250mL, 摇匀。
3 .碱性铁氰化钾溶液: 将5mL铁氰化钾溶液与200mL氢氧化钠溶液混合, 摇匀。临用前配制。
(注意：水溶液在存放过程中逐渐分解，加热或酸作用下产生剧毒氰化物。）
4 .盐酸溶液(0.1mol/L) : 移取8.5mL盐酸, 加水稀释至1000mL, 摇匀。
5 .盐酸溶液(0.01mol/L) : 量取0.1mol/L盐酸溶液50mL, 用水稀释并定容至500mL, 摇匀。
6 .乙酸钠溶液(0.05mol/L) : 称取6.80g乙酸钠, 加900mL水溶解, 用冰乙酸调pH 为4.0~5.0之间,加水定容至1000mL。经0.45μm微孔滤膜过滤后使用。
7 .乙酸钠溶液(2.0mol/L):称取27.2g乙酸钠, 用水溶解并定容至100mL, 摇匀。
8 .混合酶溶液: 称取0.40g木瓜蛋白酶、 1.27g淀粉酶, 加水定容至50mL, 涡旋, 使呈混悬状液体,冷藏保存。临用前再次摇匀后使用。
标准品
维生素B1标准品: 盐酸硫胺素( C12H17ClN4OS·HCl ) , 纯度≥99.9%
标准溶液配制
1 、维生素B1标准储备液(500μg/mL):准确称取盐酸硫胺素标准品56.1mg( 精确至0.1mg) ,相当于50mg硫胺素、用0.01mol/ L盐酸溶液溶解并定容至100mL, 摇匀。置于0℃~4℃冰箱中, 保存期为3个月。
2 、维生素B1标准中间液( 10.0μg / mL) : 准确移取2.00mL标准储备液, 用水稀释并定容至100mL,摇匀。临用前配制。
3 、维生素B1标准系列工作液: 吸取维生素B1标准中间液2mL、5mL、10mL、 15mL、30mL, 用水定容至100mL,标准系列工作液中维生素B1的浓度分别为0.2μg /m L, 0.5μg/mL,1.0μg /mL,1.5μg/ m L, 3.0μg/mL, 临用时配制。
维生素B2标准品:核黄素（C17H20N4O6)纯度98%
1 、维生素 B2 标准储备液（250 μg/mL）：称取25mg （精确至0.1 mg）维生素 B2 标准品，加入盐酸2 mL，超声溶解后，立即用水转移并定容至100 mL。置于棕色玻璃容器中在0℃～4℃冰箱贮存，保存期为3 个月。
2 、维生素 B2 标准中间液：准确吸取4.00 mL 标准储备液，用水稀释并定容至100 mL，此溶液中维生素 B2 浓度为 10 μg/mL。临用前配制。
3 、维生素B2 标准系列工作液：分别吸取维生素 B2 标准中间液1.00 mL、2.00 mL、5.00 mL、10.00 mL、15.00 mL用水溶解并定容至50mL。该标准系列浓度分别为0.00 0.20 μg/mL、0.40 μg/mL、1.00 μg/mL、2.00μg/mL、3.00 μg/mL。临用前配制。
仪器和设备
高效液相色谱仪, 配置荧光检测器
分析天平: 感量为0.01g和0.1mg
离心机: 转速≥4000r/min
pH计: 精度0.01
电热恒温干燥箱或高压灭菌锅
样品前处理
称取5g固体试样或者20g液体试样于150mL锥形瓶中加60mL0.1mol/L盐酸溶液, 充分摇匀, 用牛皮纸封口, 高压灭菌锅中121℃保持30min。
水解结束待冷却至40℃以下取出,轻摇数次;
用pH计指示, 用2.0mol/ L乙酸钠溶液调节pH 至4.0左右,加入2.0mL( 可根据酶活力不同适当调整用量) 混合酶溶液, 摇匀后, 置于培养箱中37℃过夜( 约16h) ;
将酶解液全部转移至100ml容量瓶中, 用水定容至刻度, 摇匀, 离心或者过滤, 取上清液备用。
上机测B2。
试液衍生化
准确移取上述上清液或者滤液2.0mL于10mL试管中, 加入1.0mL碱性铁氰化钾溶液,涡旋混匀后衍生10min,准确加入2.0mL正丁醇, 再次涡旋混匀1.5min转速5000r离心10min, 待充分分层后, 吸取正丁醇相( 上层)经0.45μm有机微孔滤膜过滤,取滤液于2mL棕色进样瓶中, 供分析用。另取2.0mL标准系列工作液,与试液同步进行衍生化。
注意事项
室温条件下衍生产物在4h内稳定
操作过程应在避免强光照射的环境下进行
标准物质同步进行衍生。
使用棕色样品瓶。
样品灭菌后调pH时,pH尽量调到4的时候在加入混合酶
B1样品衍生化时，加入正丁醇后，一定要在涡旋振荡器上震荡1min
样品前处理流程图
仪器参考条件
色谱柱: C18反相色谱柱(粒径5μm,250mm×4.6mm) 或相当者
流动相: 0.05mol/L乙酸钠溶液-甲醇(65+35)
流速: 0.8mL/m i n
B1检测波长: 激发波长375nm,发射波长435nm
B2检测波长:激发波长462nm,发射波长522nm
进样量: 20μL
检测前色谱柱的平衡
先用水：甲醇=1:1,流速为0.7ml/min，冲洗色谱柱30min；再用水：甲醇=65:35，流速为1ml/min,平衡60min；再用检测时流动相，流速为1ml/min，平衡约60min。荧光检测器灯提前10min打开。
检测后色谱柱清洗
先用水:甲醇=65:35流速为1ml/min,平衡80min；再用纯甲醇冲洗，流速为1ml/min，冲洗70min。。
分析结果的表述
试样中维生素B 1( 以硫胺素计) 含量按式( 1) 计算式中:
X —试样中维生素B1( 以硫胺素计) 的含量, 单位为毫克每百克( m g / 1 0 0g) ;
c —由标准曲线计算得到的试液(提取液)中维生素B1的浓度,单位为微克每毫升(μg/mL) ;
V — 试液( 提取液) 的定容体积, 单位为毫升( mL) ;
f — 试液( 上清液) 衍生前的稀释倍数;
m — 试样的质量, 单位为克( g) 。
计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示, 结果保留三位有效数字。
注:试样中测定的硫胺素含量乘以换算系数1. 1 2 1, 即得盐酸硫胺素的含量
加标回收试验：
维生素B1回收率99%
维生素B2回收率99%
4.GB 23200.96-2016 蜂蜜中杀虫脒及其代谢产物残留量的测定
GB 23200.96-2016 食品安全国家标准
蜂蜜中杀虫脒及其代谢产物残留量的测定
液相色谱-质谱_质谱法
前言
本标准代替SN/T 0213.1-2011《出口蜂蜜中杀虫脒及其代谢产物残留量的测定液相色谱—质谱/质谱法》。
本标准与SN/T 0213.1-2011相比，主要变化如下：
—标准文本格式修改为食品安全国家标准文本格式；
—标准名称“出口蜂蜜”改为“蜂蜜”；
—标准范围中增加“其它食品可参照执行”。
本标准所代替标准的历次版本发布情况为：
—SN/T 0213.3-1993
—SN/T 0213.1-2011。
1 范围
本标准规定了蜂蜜中中杀虫脒及其代谢物（4-氯邻甲苯胺）的液相色谱-质谱/质谱检测方法。
本标准适用于蜂蜜（洋槐蜜、荆条蜜、蜂巢蜜、杂花蜜、野蜂蜜等）中杀虫脒及其代谢物（4-氯邻甲苯胺）残留量的液相色谱-质谱/质谱测定和确证，其它食品可参照执行。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB 2763 食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
3 原理
试样用氢氧化钠水溶液稀释溶解，经HLB固相萃取柱净化，液相色谱-串联质谱仪测定，外标法定量。
4 试剂和材料
除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为符合GB/T 6682中规定的一级水。
4.1 试剂
4.1.1 乙腈（CH3CN），高效液相色谱纯。
4.1.2 甲醇（CH3OH），高效液相色谱纯。
4.1.3 氢氧化钠（NaOH）。
4.1.4 硫酸（H2SO4）。
4.1.5 甲酸（HCOOH），纯度≥99%。
4.2 溶液配制
4.2.1 0.02 mol/L 氢氧化钠溶液：溶解800 mg 氢氧化钠于1 L 水中，使用期为1 个月。
4.2.2 1 mol/L 硫酸溶液：于适量水中缓慢移入54.3 mL 浓硫酸,边溶解边搅拌，用水稀释至1 L，使用期为3 个月。
4.2.3 10 mmol/L 硫酸溶液：于适量水中缓慢移入10 mL 1 mol/L硫酸,边溶解边搅拌，用水稀释至1 L，使用期为1个月。
4.2.4 乙腈水溶液：乙腈：水（3+7，V/V）。
4.2.5 0.1%甲酸溶液：1 mL 甲酸溶解于水中，并定容至1 L。
4.3 标准品
4.3.1 杀虫脒标准品（chlordimeform, C10H13ClN2, CAS: 6164-98-3：纯度≥99%）和4-氯邻甲苯胺标准品（4-chloro-o-toluidine, C7H8ClN, CAS：95-69-2：纯度≥99%）。
4.4 标准溶液配制
4.4.1 标准储备液的配制：准确称取适量的杀虫脒和4-氯邻甲苯胺标准品，用乙腈配制成浓度为1.0mg/mL的标准储备溶液。该溶液在-18℃冰箱中保存。有效期为12个月。
4.4.2 标准中间溶液的配制：用乙腈分别稀释标准储备液至终浓度约为1.0 μg/mL，低于4℃避光冷藏保存，有效期为6个月。
4.4.3 基质标准工作溶液的配制：根据需要，临用时吸取一定量的标准中间溶液，用基质空白溶液配制成适当浓度的混合标准工作溶液。低于4℃避光冷藏保存，现用现配。
4.5 材料
4.5.1 HLB固相萃取小柱（亲水亲脂平衡柱）： 60 mg（填料：聚苯乙烯-二乙烯基苯-吡咯烷酮）, 3 mL或相当者。使用前依次用3 mL甲醇、3 mL水活化。
4.5.2 微孔滤膜：0.22 μm ，有机系。
5 仪器和设备
5.1 液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。
5.2 电子天平：感量分别为0.01g和0.0001 g。
5.3 涡漩混匀器。
5.4 固相萃取装置。
5.5 氮吹仪。
5.6 离心管：15 mL。
5.7 玻璃试管：10 mL，具刻度。
5.8 恒温水浴锅。
6 试样制备与保存
6.1 试样制备
取代表性蜂蜜样品约500 g，取样部位按GB 2763附录A执行，对无结晶的蜂蜜样品将其搅拌均匀。对有结晶析出的蜂蜜样品，在密闭情况下，将样品瓶置于不超过60℃的水浴中温热，振荡，待样品全部融化后搅匀，迅速冷却至室温，在融化时必须注意防止水分挥发。装入洁净容器，密封，标明标记。
6.2 试样保存
试样于常温状态下保存。
在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。
7 分析步骤
7.1 提取
称取试样1 g（精确到0.01 g）于15 mL离心管中，加入10 mL 0.02 mol/L 氢氧化钠溶液，在2000 r/min下涡旋震荡，混匀。
7.2 净化
将上述提取液转移至HLB 固相萃取柱中，再加入3 mL 水洗涤液离心管，过柱。用3 mL 水和1 mL10 mmol/L 硫酸溶液淋洗小柱，弃去淋出液，抽干。用2 mL 乙腈洗脱，收集于10 mL 试管中，洗脱液在室温下氮吹近干，准确加入1.0 mL 乙腈：水（3+7, V/V），振荡溶解，过0.22 μm 滤膜，供测定。
7.3 测定
7.3.1 液相色谱-质谱参考条件：
a) 色谱柱：C18 色谱柱，长50 mm，内径4.6 mm，粒径1.8 μm，或相当者；
b) 流动相：乙腈-0.1%甲酸溶液，梯度洗脱程序见表1；
c) 流速：0.50 mL/min；
d) 柱温：30 ℃；
e) 进样量：10μL；
f) 离子源：电喷雾离子源（ESI）；
g) 扫描方式：正离子；
h) 监测方式：多反应监测（MRM）；
i) 质谱条件见附录A。
7.3.2 色谱测定与确证
根据样液中被测化合物的含量，选定峰面积相近的标准工作溶液，对标准工作液和样液等体积参插进样，测定标准工作溶液和样液中被测化合物的响应值均应在仪器检测的线性范围内，用标准工作曲线按外标法定量。在上述色谱条件下杀虫脒和4-氯邻甲苯胺的参考保留时间分别为1.3和4.4 min，杀虫脒和4-氯邻甲苯胺标准品多反应检测（MRM）色谱图参见附录B中图B.1。
按照液相色谱-质谱条件测定样品和标准工作溶液，样品的质量色谱峰保留时间与标准品中对应的保留时间偏差在±2.5%之内；且样品中各组分定性离子的相对丰度与接近浓度的标准工作溶液中相应的定性离子的相对丰度进行比较，偏差不超过表2 规定的范围，则可判定样品中存在对应的被测物。
7.4 空白实验
除不加试样外，均按上述测定步骤进行。
8 结果计算和表述
用色谱数据处理机或按下式（1）计算试样中杀虫脒或4-氯邻甲苯胺残留量：
式中：
Xi ——试样中杀虫脒或4-氯邻甲苯胺残留含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；
Ai ——样液中杀虫脒或4-氯邻甲苯胺的峰面积；
V ——样液最终定容体积，单位为毫升(mL)；
Asi ——标准工作溶液中杀虫脒或4-氯邻甲苯胺的峰面积；
Csi ——标准工作溶液中杀虫脒或4-氯邻甲苯胺的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）；
m ——最终样液代表的试样量，单位为克(g)。
注：计算结果须扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留两位有效数字。
9 精密度
9.1 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附录D的要求。
9.2 在再现性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附录E的要求。
10 定量限和回收率
10.1 定量限
本方法的定量限为5 μg/kg。
10.2 回收率
当添加水平为5、10、20 μg/kg 时，杀虫脒和4-氯邻甲苯胺在不同基质中的添加回收率见附录C。
转载自：http://www.xpl-hplc.com/enstyle/articleinfo_11737174.html?_v=1671699792
